समझाया: कोरोनावायरस (COVID-19) का पता लगाने के पांच चरण

इस प्रक्रिया को द इंडियन एक्सप्रेस को डॉ वी रवि, वरिष्ठ प्रोफेसर और प्रमुख, न्यूरोवायरोलॉजी विभाग, निमहंस द्वारा समझाया गया था।

17 मार्च, 2020 को लिए गए इस उदाहरण में, टेस्ट ट्यूब में नकली खून देखा जा सकता है, जिस पर कोरोना वायरस (कोविड-19) लिखा हुआ है।

डॉ वी रवि, वरिष्ठ प्रोफेसर और प्रमुख, न्यूरोवायरोलॉजी विभाग, निमहंस, कोरोनवायरस का पता लगाने की प्रक्रिया के बारे में बताते हैं यह वेबसाइट . यहाँ पाँच चरण हैं:

संग्रह और परिवहन

परीक्षण केंद्र नाक गुहाओं और गले के पीछे (ग्रसनी) से स्वाब लेता है, और एक वायरस परिवहन माध्यम में नमूने डालता है, जिसमें वायरस को विघटित होने से रोकने के लिए संतुलित लवण और एल्ब्यूमिन होता है। इसके बाद सैंपल को कोल्ड स्टोरेज में टेस्टिंग लैब में ले जाया जाता है।

वायरल आरएनए का निष्कर्षण

कोरोनविर्यूज़ जैसे SARS-CoV (जो 2002-03 में चीन में उभरा), MERS-CoV (जो 2012 में सऊदी अरब में दिखाई दिया), या वर्तमान SARS-CoV-2 जो COVID-19 महामारी का कारण बना है, बड़े हैं। , एकल-फंसे आरएनए जीनोम। परीक्षण प्रयोगशाला व्यावसायिक रूप से उपलब्ध किट (जैसे कि QIAGEN जैसी कंपनियों द्वारा बनाई गई) का उपयोग करके नमूनों से RNA निकालती है।

पीसीआर मिक्स में आरएनए डालना

निकाले गए आरएनए को पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) मिश्रण में जोड़ा जाता है। इसमें 'मास्टर मिक्स' शामिल है, जिसमें 'रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस' एंजाइम होता है जो आरएनए को डीएनए में परिवर्तित करता है। मास्टर मिक्स में टाक पोलीमरेज़ होता है, वह एंजाइम जो डीएनए, न्यूक्लियोटाइड्स, साथ ही मैग्नीशियम जैसे अन्य तत्वों की प्रतियां बनाता है - डीएनए को बढ़ाने के लिए एक आयन की आवश्यकता होती है।

पीसीआर मिश्रण में 'अभिकर्मक' जैसे 'प्राइमर' और 'जांच' भी होते हैं। प्राइमर डीएनए के विशेष स्ट्रेंड होते हैं जिन्हें कॉपी किए जाने वाले डीएनए के साथ बांधने के लिए डिज़ाइन किया गया है; डीएनए नमूने में विशिष्ट अनुक्रम का पता लगाने के लिए जांच का उपयोग किया जाता है। WHO ने COVID-19 के परीक्षण के लिए विशिष्ट प्राइमर और जांच की सिफारिश की है।

अंत में, पीसीआर मिश्रण में हाउसकीपिंग जीन होता है - एक सामान्य मानव जीन (आरएनसे पी) जिसका उपयोग यह सुनिश्चित करने के लिए किया जाता है कि नमूने ठीक से एकत्र किए गए थे, और आरएनए निकाला गया था।

वायरल डीएनए का प्रवर्धन

इसके पीसीआर मिक्स में सैंपल को ट्यूब या प्लेट में डाला जाता है, जिसे बाद में एक थर्मल साइक्लर मशीन में डाल दिया जाता है जिसका इस्तेमाल पीसीआर प्रक्रिया को करने के लिए किया जाता है।

सबसे पहले, आरएनए को डीएनए में परिवर्तित किया जाता है। फिर जीन की प्रतिलिपि बनाने की प्रक्रिया शुरू होती है। थर्मल साइक्लर नमूने के साथ मिश्रण को गर्म और ठंडा करता है, तीन तापमानों के बीच बारी-बारी से - दो स्ट्रैंड को अलग करने के लिए डीएनए को पिघलाने के लिए, प्राइमर को डीएनए से बांधने के लिए, और एक नए स्ट्रैंड को संश्लेषित करने के लिए - सभी एक चक्र के भीतर जो एक तक रहता है मिनट। वायरस की जांच के लिए डीएनए को बढ़ाने के लिए थर्मल साइक्लर 30-40 ऐसे चक्र चलाता है।

नियंत्रण के खिलाफ परीक्षण

एम्प्लीफाइड डीएनए का परीक्षण एक सकारात्मक नियंत्रण के खिलाफ किया जाता है, जिसमें आमतौर पर प्लास्मिड में क्लोन किए गए वायरस के जीन होते हैं, और एक नकारात्मक नियंत्रण होता है, जो एक 'ज्ञात' नमूना है जिसने पहले वायरस के लिए नकारात्मक परीक्षण किया है।

RNase P को प्रवर्धन दिखाना चाहिए, सकारात्मक नियंत्रण सकारात्मक होना चाहिए, नकारात्मक नियंत्रण नकारात्मक होना चाहिए, और फिर जो भी परिणाम आपको नमूने के लिए मिलता है, वह सही परिणाम है, न्यूरोवायरोलॉजिस्ट डॉ वी रवि ने कहा। परिणाम जारी होने से पहले एक परीक्षण के वैध होने के लिए, कुछ 'वैधता मानदंड' को पूरा करना होगा।

समझाया से न चूकें | COVID-19 परीक्षण कैसे काम करता है

यदि हाउसकीपिंग जीन (RNase P) सकारात्मक है, सकारात्मक नियंत्रण सकारात्मक है, नकारात्मक नियंत्रण नकारात्मक है, और नमूना कोई PCR सकारात्मक परिणाम नहीं दिखाता है, तो नमूना SARS-CoV-2 वायरस RNA के लिए नकारात्मक घोषित किया जाता है। यदि पीसीआर परिणाम सकारात्मक है, तो रोगी को COVID-19 है।

अपने दोस्तों के साथ साझा करें: