समझाया: TrueNat परीक्षण कैसे काम करता है

SARS-CoV-2 वायरस, जो कोविड -19 का कारण बनता है, में डीएनए नहीं, बल्कि एक आरएनए अणु होता है। परीक्षण में जीन को पकड़ने से पहले रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रक्रिया (आरटी-पीसीआर में आरटी) आरएनए को डीएनए अणु में बदल देती है।

एक परीक्षण नमूना TrueNat चिप पर लोड किया जाता है। (स्रोत: मोल्बियो डायग्नोस्टिक्स)

कुछ हफ़्ते पहले, भारतीय चिकित्सा अनुसंधान परिषद (ICMR) ने के उपयोग को मंजूरी दी थी ट्रूनेट मशीनें , गोवा स्थित एक कंपनी द्वारा निर्मित, कोविड -19 रोग के लिए पुष्टिकरण परीक्षण करने के लिए। इससे पहले, ये मशीनें, जो मूल रूप से कुछ साल पहले रोगियों में तपेदिक का पता लगाने के लिए विकसित की गई थीं, का उपयोग वर्तमान कोरोनावायरस महामारी में केवल रोगियों की जांच के लिए किया जा रहा था।

ICMR की मंजूरी के बाद, इन मशीनों को अब कई राज्यों द्वारा मांगा जा रहा है, विशेष रूप से जिनके पास एक मजबूत प्रयोगशाला नेटवर्क की कमी है जो पारंपरिक RT-PCR परीक्षणों को करने के लिए आवश्यक है। उत्तर प्रदेश को जहां अपने सभी 75 जिलों में 117 मशीनें लगाने का आदेश दिया गया है, वहीं बिहार ने 50 मशीनों का ऑर्डर दिया है. झारखंड, छत्तीसगढ़, ओडिशा, तेलंगाना, आंध्र प्रदेश सभी ने इन मशीनों की मांग की है, और इनमें से कई को पहले ही तैनात किया जा चुका है।

ट्रूनेट कैसे काम करता है?

इसे समझने के लिए, यह समझने में मदद मिलती है कि पारंपरिक पीसीआर परीक्षण कैसे काम करते हैं। पीसीआर स्वैब नमूने में डीएनए से एक विशिष्ट जीन को पकड़ने और इसे रासायनिक प्रक्रियाओं की एक श्रृंखला के माध्यम से गुणा करने की एक विधि है ताकि फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करके इसका पता लगाया जा सके। अधिकांश आधुनिक पीसीआर परीक्षण, जिनका उपयोग अन्य प्रकार के वायरस का भी पता लगाने के लिए किया जाता है, वास्तविक समय में काम करते हैं। चेन रिएक्शन होने पर भी परिणाम दिखाई देता है।

SARS-CoV-2 वायरस, जो कोविड -19 का कारण बनता है, में डीएनए नहीं, बल्कि एक आरएनए अणु होता है। परीक्षण में जीन को पकड़ने से पहले रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रक्रिया (आरटी-पीसीआर में आरटी) आरएनए को डीएनए अणु में बदल देती है।

TrueNat एक चिप-आधारित, बैटरी से चलने वाला RT-PCR किट है। प्रारंभ में, यह केवल SARS-CoV-2 वायरस में ई-जीन की पहचान कर सका। यह वह जीन है जो वायरस को अपने चारों ओर एक गोलाकार लिफाफा बनाने में मदद करता है। इस बिंदु पर, TrueNat मशीनों का उपयोग स्क्रीनिंग परीक्षण के रूप में किया गया था। ई-जीन के साथ पाए गए नमूनों को प्रयोगशालाओं में पुष्टिकरण आरटी-पीसीआर परीक्षणों के लिए भेजा जा सकता है। लेकिन नई मशीनें अब वायरस RNA में पाए जाने वाले RdRp एंजाइम का पता लगाने के लिए सुसज्जित हैं, और इसलिए ICMR ने फैसला सुनाया है कि इन परीक्षणों को उपन्यास कोरोनवायरस की उपस्थिति की पुष्टि के रूप में माना जा सकता है।

बड़ा अंतर यह है कि मशीन पोर्टेबल है, और इसके साथ परीक्षण की लागत पारंपरिक आरटी-पीसीआर परीक्षणों की तुलना में बहुत कम है। यह इसे आंतरिक जिलों और दूर-दराज के स्थानों में तैनात करने के लिए बेहद उपयोगी बनाता है जहां से बड़े शहरों में परीक्षण के लिए स्वाब एकत्र करना और भेजना एक मुश्किल काम है। वास्तव में, इन मशीनों को पहले ही आंध्र प्रदेश के उत्तरी तटीय क्षेत्र के गांवों और गढ़चिरौली जिले के वन क्षेत्रों के अंदर तैनात किया जा चुका है।

परीक्षण कैसे आयोजित किया जाता है?

एक बार इन जगहों पर स्थापित कियोस्क पर, या नियंत्रण क्षेत्रों या स्वास्थ्य शिविरों में स्वाब एकत्र किया जाता है, तो इसे एक वायरल ट्रांसमिशन माध्यम में डुबोया जाता है जहां यह बेअसर हो जाता है। प्राथमिक स्वास्थ्य केंद्र या पास की प्रयोगशाला में, इसे एक अन्य तरल, एक वायरल लिसिस बगर में स्थानांतरित किया जाता है, जिसमें कोशिकाएं टूट जाती हैं और अशुद्धियाँ हटा दी जाती हैं। इस तरल के एक हिस्से को फिर एक कार्ट्रिज में स्थानांतरित किया जाता है जो एक चपटा टेप कैसेट जैसा दिखता है और एक कैसेट प्लेयर की तरह मशीन के अंदर डाला जाता है। प्ले बटन प्रक्रिया को सक्रिय करता है। केवल 20 मिनट में, प्रक्रिया आरएनए को निकालती है, जीनोम निर्देशों का हस्ताक्षर सेट जो एक कोशिका को मानव कोशिका में प्रवेश करने के बाद वायरस को गुणा करने का आदेश देता है। इस आरएनए अर्क को फिर दूसरी मशीन में स्थानांतरित कर दिया जाता है, जहां तरल को एक लघु कुएं में छोड़ा जाता है जो एक इलेक्ट्रॉनिक चिप से जुड़ा होता है जो मानव अंगूठे से बड़ा नहीं होता है।

जबकि लघु कुआं वह है जहां अभिकर्मक आरएनए को सक्रिय करता है, यह वह चिप है जिसे वायरल लोड की सभी गणनाओं के साथ खिलाया जाता है जो यह पता लगाने में मदद करता है कि कोई व्यक्ति वायरस ले जा रहा है या नहीं। पारंपरिक आरटी-पीसीआर परीक्षणों के विपरीत, इस प्रक्रिया में अभिकर्मकों को अत्यधिक तापमान की आवश्यकता नहीं होती है, और परीक्षण के लिए आवश्यक स्वैब की मात्रा भी बहुत कम होती है।

यह देखते हुए कि मशीनों को तपेदिक के परीक्षण के लिए विकसित किया गया था, क्या उन्हें कोविड -19 परीक्षण के लिए अनुकूलन की आवश्यकता थी?

गोवा स्थित मोल्बियो डायग्नोस्टिक्स प्राइवेट लिमिटेड द्वारा डिजाइन की गई मशीन मूल रूप से तपेदिक के निदान के लिए विकसित की गई थी, जो हर साल कम से कम दस लाख बच्चों को प्रभावित करती है। कम से कम एक दशक के शोध के परिणामस्वरूप, इन मशीनों को हाल ही में विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) द्वारा अनुमोदित किया गया था, जिसने प्रमाणित किया कि ये मशीनें इस उद्देश्य के लिए डब्ल्यूएचओ द्वारा अनुमोदित अन्य वाणिज्यिक उत्पादों के समान सटीकता दिखाती हैं। ये मशीनें इस साल अप्रैल से तैनात होने के लिए तैयार थीं।

गोवा मैन्युफैक्चरिंग डिवीजन में बैठे मोलबियो डायग्नोस्टिक्स के राष्ट्रीय बिक्री प्रबंधक शिव श्रीराम ने कहा कि जब कोविड हुआ। टीबी का जल्द पता लगाने की आवश्यकता है, और इसलिए सटीक निदान होना महत्वपूर्ण है। स्मीयर माइक्रोस्कोपी के विपरीत, जिसमें 50:50 सटीकता होती है, हम बेहतर सटीकता प्राप्त करना चाहते थे, और अपने शोध को जारी रखा। 18 साल का शोध हो गया है …, उन्होंने कहा।

मशीन के दिल को विभिन्न प्रकार के संक्रमणों का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया है। यह वह चिप है जो हर संक्रमण के लिए विशिष्ट है। कंपनी ने उस चिप को डिजाइन करने में 15 दिन का समय लिया, जिसमें कोरोनावायरस का पता लगाने के लिए सभी वायरल लोड डायग्नोसिस थे।

श्रीराम के मुताबिक, कंपनी स्वास्थ्य मंत्रालय द्वारा टीबी डायग्नोस्टिक्स के लिए उपलब्ध कराई गई कंसाइनी लिस्ट की डिलीवरी की व्यवस्था करने में व्यस्त थी। पांच सौ मशीनों को सभी राज्यों और केंद्र शासित प्रदेशों के बीच बांटा गया था। उसके बाद राज्यों ने अपने आप ऑर्डर देना शुरू कर दिया था। उन्होंने कहा कि आज की स्थिति में करीब 1,000 मशीनों की बुकिंग हो चुकी है और हम अगले दो महीनों में 3,000 से 4,000 और मशीनों के ऑर्डर की उम्मीद कर रहे हैं।

यह गोवा था जिसने सबसे पहले कोविड-19 स्क्रीनिंग के लिए नई संशोधित मशीन खरीदी थी। लेकिन आंध्र प्रदेश वह राज्य था जिसने 2.5 लाख से अधिक स्क्रीनिंग परीक्षण चलाकर इसका सबसे अधिक उपयोग किया।

मांग तब बढ़ी जब बिहार, उत्तर प्रदेश और ओडिशा जैसे राज्यों में मामले बढ़ने लगे, क्योंकि प्रवासी मई के दूसरे सप्ताह में लौटने लगे। मशीन ने पहले ही इन राज्यों के कई हिस्सों में घर-घर जाकर सर्वेक्षण करना शुरू कर दिया है।

TrueNat पारंपरिक परीक्षणों के साथ तुलना कैसे करता है?

पारंपरिक आरटी-पीसीआर के लिए आरएनए निष्कर्षण और विश्लेषण की आवश्यकता दो अलग-अलग कमरों में कोल्ड स्टोरेज और प्रयोगशाला डिज़ाइन किए गए उपकरणों को संभालने वाले प्रशिक्षित विशेषज्ञों के साथ की जाती है। दूसरी ओर ट्रूनेट को मुख्य रूप से दूरस्थ स्थानों पर काम करने के लिए डिज़ाइन किया गया है, और इसे 'लास्ट माइल डायग्नोस्टिक्स' माना जाता है।

मशीन पोर्टेबल है और इसे ब्रीफकेस में ले जाया जा सकता है, बैटरी एक बार चार्ज होने पर दस घंटे तक चलती है। श्रीराम ने कहा कि आठ घंटे की शिफ्ट में 45 टेस्ट होते हैं और अधिकांश राज्य वर्तमान में एक दिन में तीन शिफ्ट चल रहे हैं। उन्होंने कहा कि अधिकांश राज्यों ने चार स्लॉट मशीन के लिए भी आदेश दिया है जो एक साथ चार परीक्षण करने की अनुमति देता है।

चार स्लॉट मशीनों में से प्रत्येक की कीमत 13 लाख रुपये से अधिक है लेकिन परीक्षण किट केवल 1,300 रुपये में आती है।

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